除病毒過濾在單抗工藝中的應(yīng)用
除病毒過濾對(duì)患者安全至關(guān)重要，監(jiān)管機(jī)構(gòu)越來越多地要求除病毒過濾驗(yàn)證研究是在***差條件下進(jìn)行的，ICH Q5A和PDATR41都指出低壓和壓力中斷代表了***差的測(cè)試條件，應(yīng)當(dāng)在除病毒驗(yàn)證研究中加以考慮，Cytiva除病毒濾器SV4和Prime相關(guān)研究如下。 除病毒過濾概述
單克隆抗體是由單***B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均***的抗體，主要用于自身免疫疾病、腫瘤、傳染病等領(lǐng)域的治療，生產(chǎn)流程主要為：細(xì)胞培養(yǎng)→澄清收獲→層析純化→除病毒過濾→UFDF→制劑。
***些純化工藝可以滅活或者去除部分病毒，由于病毒性質(zhì)的多樣性，***內(nèi)外的指南中均指出了建議采用兩種作用機(jī)制不同的工藝步驟清除病毒，至少有***步工藝對(duì)非包膜病毒有效。PDA TR41技術(shù)報(bào)告中闡述了除病毒過濾作為藥品生產(chǎn)企業(yè)總體病毒安全策略的***部分，基于尺寸排阻的機(jī)制為病毒去除提供了有力保障。
然而，隨著對(duì)除病毒過濾的知識(shí)增加（其中尺寸排阻是主要的去除機(jī)制），有報(bào)道認(rèn)為：第***代除病毒過濾器的性能可能會(huì)受到過濾中斷和低壓力或低流速的負(fù)面影響。
新***代除病毒過濾器旨在克服這些缺點(diǎn)。然而，由于除病毒過濾對(duì)患者安全至關(guān)重要，監(jiān)管機(jī)構(gòu)越來越多地要求***終用戶證明他們的除病毒過濾驗(yàn)證研究是在***差條件下進(jìn)行的。修訂后的ICH Q5A監(jiān)管文件和行業(yè)指南PDA TR41進(jìn)***步描述了這***點(diǎn)。這兩份文件都指出，低壓和壓力中斷屬于***差測(cè)試條件，應(yīng)當(dāng)在除病毒驗(yàn)證研究中加以考慮。
除病毒產(chǎn)品及應(yīng)用
Cytiva除病毒過濾產(chǎn)品包括PVDF（聚偏二氟乙烯）和PES（聚醚砜）兩種膜材，滿足不同料液過濾需求。從小試規(guī)模到生產(chǎn)***濾器，在生產(chǎn)過程中嚴(yán)格遵循相同的質(zhì)量管理體系，不同批次間有優(yōu)異的***致性、穩(wěn)定性，保證生產(chǎn)順利進(jìn)行。
Pegasus SV4 SV4推薦的過濾壓力為2.1-3.1 bar，在實(shí)際生產(chǎn)工藝中，可能會(huì)面臨過濾中斷和低壓，可能會(huì)對(duì)除病毒過濾器的性能產(chǎn)生負(fù)面影響。 下圖二測(cè)試了SV4在不同壓力下，在不同體積載量下，PP7滴度降的變化情況。 10 psi 的壓力產(chǎn)生***低的 PP7 滴度降（平均滴度降3.8 x 105） 15 psi 和 20 psi 時(shí)的平均滴度降高出 1 log 以上（分別為 7.0 x 106 和 2.2 x 106） 當(dāng)壓力增加到≥30 psi時(shí)， PP7滴度降≥107 應(yīng)該注意的是，即使在測(cè)試的***低工作壓力10 psi下， SV4仍然滿足PP7滴度降>104，具有穩(wěn)健的病毒清除能力。 圖二：SV4不同測(cè)試壓力下PP7與體積載量的滴度降情況
SV4壓力中斷研究如下圖三，測(cè)試了磷酸鹽緩沖鹽水中的牛血清白蛋白在3.1 bar壓力下，隨著過濾體積載量的增加，中斷10 minutes和30 minutes時(shí)，PP7滴度降均5 log以上，具有穩(wěn)健的病毒清除能力。
圖三：SV4壓力中斷時(shí)PP7與體積載量的滴度降情況 Pegasus? Prime
Prime推薦的過濾壓力為2.1-3.1 bar，Cytiva評(píng)估了噬菌體PP7在壓力范圍0.2–3.1 bar下，Prime過濾器在磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中0.125–0.25 g/L IgG中的去除情況，如圖五所示，即使在低至0.2 bar壓力下，也有穩(wěn)健的病毒清除效果。
圖五：Prime在不同壓力下PP7的滴度降情況
Prime壓力中斷研究如下圖六、圖七所示，測(cè)試了PBS中0.125 g/L IgG在高壓力2 bar條件和低壓力0.2 bar、0.3 bar條件下，隨著過濾體積載量增加進(jìn)行壓力中斷，數(shù)據(jù)顯示Prime濾器的病毒清除效果未受壓力中斷的影響，具有穩(wěn)健的病毒清除能力。
圖六：Prime在高壓力中斷時(shí)PP7的滴度降情況 圖七：Prime在低壓力中斷時(shí)PP7的滴度降情況 為了響應(yīng)人們對(duì)在連續(xù)生物工藝中使用除病毒過濾器的日益增加的濃厚興趣，Cytiva已經(jīng)完成了研究，證明SV4和Prime除病毒濾器在低壓和壓力中斷條件下使用的穩(wěn)健性。 雖然***終用戶有責(zé)任驗(yàn)證除病毒過濾在其特定應(yīng)用條件下的性能，但本文中顯示的數(shù)據(jù)有助于證明SV4和Prime強(qiáng)大病毒去除效果，即使在低壓和壓力中斷的***差條件下仍具有穩(wěn)健的病毒清除能力。
注：文章來源于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系刪除
